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FRP-3双切口酶质粒(h) | sc-402504-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FRP-3双切口酶质粒(h2) | sc-402504-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 FRZB 基因编码卷曲相关蛋白 3(frizzled-related protein 3,FRP-3),这是一种分泌型 Wnt 拮抗因子,可与 Wnt 配体结合并调节其与 Frizzled 受体的相互作用,从而精细调控 β-连环蛋白(β-catenin)依赖的转录。通过抑制经典 Wnt 信号通路,FRP-3 影响细胞命运决定、细胞外基质重塑,以及间充质和骨骼组织中的分化程序。FRZB 活性改变与 Wnt 通路输出失衡有关,这与软骨稳态和骨关节退变相关;同时它也常被作为一种具有情境依赖性的调控因子,用于研究肿瘤相关信号。因而,对 FRZB 的扰动有助于研究 Wnt 梯度控制、通路串扰,以及调控增殖与分化的转录网络。
FRP-3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 FRZB 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FRZB内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏FRZB的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了FRZB基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。