Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Flotillin-2 Plasmide Double Nickase (m): sc-420382-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Flotillin-2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Flotillin-2 Double Nickase Plasmid (m) e il Flotillin-2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Flot2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Flotillin-2 Antibody (B-6): sc-28320
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Flotillin-2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-420382-NIC | 20 µg | $410.00 |
Flot2 codifica la flotillina-2, una proteina scaffold associata ai lipid raft, arricchita sulla membrana plasmatica e nei compartimenti endosomiali, dove contribuisce a organizzare i microdomini di membrana. La flotillina-2 partecipa all’endocitosi indipendente dalla clatrina, al traffico di membrana e alla trasduzione del segnale coordinando l’internalizzazione dei recettori e le vie chinasi a valle, incluse le vie di segnalazione MAPK e PI3K/AKT. Contribuisce inoltre alla dinamica del citoscheletro di actina, all’adesione cellulare e alla migrazione attraverso interazioni con domini simili alle caveole e con regolatori del citoscheletro. Alterazioni dell’espressione o della localizzazione della flotillina-2 sono state associate, in oncologia, a fenotipi di proliferazione e invasione deregolati e a perturbazioni della segnalazione in neuroni e cellule immunitarie, a supporto della sua rilevanza in modelli meccanicistici di malattia.
Flotillin-2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Flot2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Flot2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Flot2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Flot2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.