FGF-6 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405239

Panoramica

FGF6 codifica il fattore di crescita dei fibroblasti 6 (FGF-6), un ligando di segnalazione secreto che interagisce principalmente con i recettori FGFR per attivare a valle le vie MAPK/ERK, PI3K/AKT e PLCγ. Contribuisce alla regolazione della proliferazione, della sopravvivenza e della differenziazione cellulare, con ruoli di rilievo nello sviluppo del muscolo scheletrico, nella rigenerazione e nel rimodellamento dei tessuti. Un’alterazione della segnalazione di FGF6 può perturbare programmi trascrizionali guidati dai fattori di crescita e processi associati alla matrice extracellulare, rendendolo pertinente per studi su segnalazione proliferativa deregolata e specificazione di linea cellulare. Nei sistemi cellulari umani, FGF-6 rappresenta un nodo accessibile per indagare il crosstalk tra fattori di crescita e l’output delle vie FGFR dipendente dal contesto.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO FGF-6 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene FGF6 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del FGF6 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto FGF6 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina FGF-6.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di FGF6 per lo studio della segnalazione di FGF-6, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni FGF6 critici per la funzione di FGF-6
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di FGF6 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal FGF-6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal FGF-6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus FGF6. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal FGF-6 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR FGF-6 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia FGF6 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio FGF6 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.