FBL10 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403232-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FBL10O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase FBL10 (h) e o Plasmídeo Double Nickase FBL10 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KDM2B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FBL10 Anticorpo (5G1): sc-293279
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FBL10 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403232-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FBL10 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403232-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O KDM2B humano codifica a proteína FBL10, uma desmetilase de histonas com domínio JmjC e um fator associado à cromatina que conecta o reconhecimento de ilhas CpG à regulação transcricional. A FBL10 participa do controle epigenético da expressão gênica por meio da desmetilação de lisinas em histonas e da coordenação com mecanismos associados ao Polycomb, influenciando a acessibilidade da cromatina e programas gênicos do desenvolvimento. Ao modular vias envolvidas na progressão do ciclo celular, diferenciação e manutenção da identidade celular, a atividade de KDM2B/FBL10 ajuda a moldar estados transcricionais específicos de linhagem. A desregulação de KDM2B foi relatada em múltiplos contextos relevantes para doenças, incluindo reprogramação transcricional oncogênica e fenótipos alterados semelhantes a células-tronco, tornando-o um nó útil para estudos mecanísticos de regulação epigenética.
FBL10 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KDM2B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KDM2B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KDM2B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KDM2B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.