Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) Fascin 1: sc-402535-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Fascin 1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Fascin 1 Double Nickase (h) et le plasmide Fascin 1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FSCN1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Fascin 1 Antibody (D-10): sc-46675
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Fascin 1 | sc-402535-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Fascin 1 | sc-402535-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FSCN1 code pour la fascin-1, une protéine de faisceautage de l’actine qui organise des filaments d’actine parallèles afin de soutenir les filopodes, les lamellipodes et d’autres structures protrusives nécessaires à la migration et à l’invasion cellulaires. La fascin-1 intègre des signaux issus du remodelage du cytosquelette et des réseaux de signalisation d’adhérence, notamment des voies en aval des petites GTPases Rho et de la dynamique des adhésions focales, afin de coordonner la motilité et le trafic membranaire. Une expression altérée de FSCN1 est fréquemment associée à des modifications des programmes de transition épithélio-mésenchymateuse, du potentiel métastatique et des phénotypes invasifs dans divers contextes tumoraux. En immunologie et en biologie stromale, FSCN1 contribue également à l’architecture du cytosquelette, pertinente pour la fonction des cellules présentatrices d’antigène et le remodelage tissulaire.
Fascin 1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FSCN1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FSCN1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FSCN1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FSCN1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.