Plásmido Doble Nickase (h) FAM20C: sc-406736-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)FAM20C consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa FAM20C (h) y el plásmido de doble nickasa FAM20C (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a FAM20C. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) FAM20C | sc-406736-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) FAM20C | sc-406736-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FAM20C codifica una proteína cinasa secretada asociada al aparato de Golgi que fosforila motivos Ser-x-Glu/pSer en numerosas proteínas secretadas y de la matriz extracelular, dando forma a su maduración, tráfico y propiedades de unión a minerales. Mediante la regulación del procesamiento de fosfoproteínas y la organización de la matriz extracelular, FAM20C influye en la diferenciación osteogénica, la formación de dentina y programas más amplios de biomineralización. La alteración de la actividad de FAM20C se asocia con trastornos hereditarios de la mineralización y fenotipos esqueléticos, y su actividad cinasa modificada se ha estudiado en contextos de remodelación tisular y cambios en la matriz extracelular asociados a tumores. Como componente central del fosfoproteoma de la vía secretora, FAM20C es relevante para estudios de señalización de quinasas del Golgi, fosfoproteómica de proteínas secretadas y comportamiento celular impulsado por la matriz.
FAM20C El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FAM20C en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FAM20C. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FAM20C. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FAM20C alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.