Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
FAAH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402470
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FAAH O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FAAH, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FAAH Anticorpo (27-Y): sc-100739
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FAAH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402470 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A FAAH (hidrolase de amidas de ácidos graxos) é uma hidrolase de serina associada à membrana que encerra a sinalização ao hidrolisar amidas bioativas de ácidos graxos, incluindo o endocanabinoide anandamida e N-aciletanolaminas relacionadas. Ao controlar o turnover de mediadores lipídicos, a FAAH modula o tônus endocanabinoide, interage com a sinalização dos receptores CB1/CB2 e influencia vias a jusante dependentes de cAMP/PKA, MAPK e cálcio. A atividade da FAAH também molda redes mais amplas do metabolismo lipídico que governam respostas celulares ao estresse e a neurotransmissão. Alterações na expressão ou na função da FAAH têm sido associadas à desregulação de vias neuroinflamatórias e de processamento da dor e são estudadas no contexto de fenótipos neuropsiquiátricos e metabólicos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FAAH (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FAAH em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FAAH, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FAAH na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FAAH.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FAAH para a investigação da sinalização de FAAH, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FAAH críticos para a função FAAH
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FAAH para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FAAH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FAAH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FAAH. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FAAH Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FAAH (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FAAH para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FAAH definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.