Plásmido Doble Nickase (h) ErbB4/HER4: sc-400275-NIC

ERBB4 codifica ErbB4/HER4, una tirosina quinasa receptora activada por ligando de la familia EGFR/ErbB que transmite señales procedentes de las neuregulinas y de factores de crecimiento relacionados. Tras su activación, ErbB4 activa las vías de señalización MAPK/ERK y PI3K–AKT, y puede participar en programas transcripcionales dependientes de JAK/STAT, influyendo en la proliferación, la diferenciación y la supervivencia de manera dependiente del contexto. ERBB4 también favorece la comunicación célula–célula y procesos del desarrollo en tejidos neurales y cardíacos mediante la heterodimerización con otros receptores ErbB y el procesamiento regulado del receptor. La desregulación de la expresión, las mutaciones o el equilibrio de señalización de ERBB4 se asocian con la reconfiguración de vías oncogénicas y con fenotipos del neurodesarrollo, lo que lo convierte en una diana útil para estudios mecanísticos de redes de señalización de receptores.

ErbB4/HER4 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ERBB4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ERBB4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ERBB4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ERBB4 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.