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ENT2双切口酶质粒(h) | sc-401952-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ENT2双切口酶质粒(h2) | sc-401952-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC29A2 编码平衡型核苷转运体2(equilibrative nucleoside transporter 2,ENT2)。ENT2 是一种广泛表达于多种组织的质膜转运蛋白,可介导嘌呤与嘧啶核苷在膜两侧按浓度梯度进行双向转运。ENT2 支持核苷补救途径,从而维持 DNA/RNA 合成所需的核苷酸储备;同时通过调控细胞外与细胞内核苷的可用性,参与细胞对代谢应激的反应。通过塑造核苷稳态,ENT2 与多种生物过程发生交叉关联,包括细胞周期推进、复制应激反应,以及多种组织中的核苷依赖性信号传导。SLC29A2/ENT2 的活性与表达改变已在肿瘤生物学、免疫细胞功能以及转运体相关差异导致的细胞对核苷类似物敏感性变化等情境中被研究,提示其具有明确的机制研究价值。
ENT2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SLC29A2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SLC29A2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SLC29A2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SLC29A2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。