DUSP22 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405867

Panoramica

DUSP22 codifica una fosfatasi a doppia specificità che defosforila residui di serina/treonina e tirosina per modulare le reti di segnalazione guidate dalle chinasi. È coinvolta nella regolazione degli output della via MAPK e nel controllo fosfo-dipendente della segnalazione dei recettori immunitari, influenzando programmi trascrizionali, stati di attivazione cellulare e apoptosi. Modulando la dinamica della fosforilazione, DUSP22 contribuisce all’omeostasi cellulare nei tessuti ematopoietici e in altri tessuti in cui la segnalazione responsiva agli stimoli è cruciale. Alterazioni dell’espressione di DUSP22 o del contesto di via sono state associate a una segnalazione immunitaria disregolata e a processi oncogenici, a supporto del suo impiego come nodo meccanicistico negli studi sulla biologia delle malattie guidate dalla segnalazione.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO DUSP22 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene DUSP22 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del DUSP22 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto DUSP22 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina DUSP22.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di DUSP22 per lo studio della segnalazione di DUSP22, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni DUSP22 critici per la funzione di DUSP22
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di DUSP22 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal DUSP22 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal DUSP22 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus DUSP22. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal DUSP22 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR DUSP22 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia DUSP22 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio DUSP22 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.