DTYMK CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423426

개요

Dtymk는 데옥시티미딜레이트 키나아제(DTYMK)를 암호화하며, dTMP를 dTDP로 인산화해 DNA 복제와 수리에 필요한 dTTP 풀을 유지하는 필수 세포질 효소입니다. DTYMK는 de novo 티미딜레이트 합성과 뉴클레오타이드 살베이지 경로를 연결함으로써, 균형 잡힌 dNTP 항상성을 통해 S기 진행, 유전체 안정성, 그리고 미토콘드리아 및 핵 DNA의 유지에 기여합니다. dTTP 가용성이 교란되면 복제 스트레스와 DNA 손상 신호전달이 증가할 수 있으며, 이는 DTYMK 기능이 세포주기 체크포인트와 염색체 무결성을 조절하는 경로와 연관됨을 시사합니다. DTYMK는 모델 시스템에서 증식 및 신경발달 관련 표현형과도 연관된 바 있어, 임상적 결과를 시사하지 않으면서도 뉴클레오타이드 대사 관련 질환 기전을 연구하는 데 유용한 표적(노드)로 활용될 수 있습니다.

DTYMK CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Dtymk 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Dtymk 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Dtymk의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 DTYMK 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 DTYMK 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Dtymk 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• DTYMK 기능에 중요한 Dtymk 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Dtymk 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• DTYMK CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 DTYMK CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Dtymk 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  DTYMK HDR 플라스미드 (m) 및 DTYMK HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Dtymk 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Dtymk 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.