Plasmide Double Nickase (h) Desmuslin: sc-409241-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Desmuslin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Desmuslin Double Nickase (h) et le plasmide Desmuslin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SYNM. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Desmuslin Antibody (A-8): sc-374484
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Desmuslin | sc-409241-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Desmuslin | sc-409241-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SYNM code la desmusline, une protéine associée aux filaments intermédiaires, enrichie dans le muscle strié, où elle contribue à organiser le réseau cytosquelettique et à maintenir l’intégrité structurelle au niveau des disques Z et des costamères. La desmusline intervient dans des voies qui régissent l’ancrage du cytosquelette, la mécanotransduction et la transmission de la force, en reliant les systèmes filamentaires à des complexes associés à la membrane. Des altérations de SYNM ont été associées à une désorganisation myofibrillaire et à une stabilité modifiée des fibres musculaires, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude des réponses au stress dépendantes du cytosquelette. En tant que composant de type échafaudage de l’architecture musculaire, la desmusline est fréquemment étudiée dans des modèles de cardiomyopathie et de myopathie squelettique afin de comprendre comment les réseaux de filaments intermédiaires préservent la résilience cellulaire.
Desmuslin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SYNM dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SYNM. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SYNM. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SYNM.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.