Plasmide Double Nickase (h) DENND2A: sc-411968-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) DENND2A correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DENND2A Double Nickase (h) et le plasmide DENND2A Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DENND2A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) DENND2A | sc-411968-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) DENND2A | sc-411968-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DENND2A (DENN domain containing 2A) code un facteur d’échange de nucléotides de guanine (GEF) cytosolique qui active des GTPases Rab impliquées dans le trafic membranaire, avec des rôles rapportés dans la régulation du transport dépendant de Rab9 et de la dynamique endosome–Golgi. Par l’intermédiaire de ces voies de transport vésiculaire, DENND2A contribue au tri intracellulaire des cargaisons, à l’organisation des membranes et à la compartimentation des voies de signalisation, ce qui peut influencer la polarité et la motilité cellulaires. Une expression altérée ou une perturbation de la régulation de DENND2A a été étudiée dans le contexte de la biologie tumorale, où des changements des programmes de trafic et de migration peuvent affecter des phénotypes liés à l’invasion. En tant que régulateur du trafic, DENND2A constitue une cible utile pour des études mécanistiques reliant le transport médié par Rab au renouvellement des récepteurs, à l’homéostasie des organites et à la signalisation en réponse au stress.
DENND2A Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DENND2A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DENND2A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DENND2A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DENND2A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.