DAZAP2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-407056

Panoramica

DAZAP2 (DAZ-associated protein 2) è una proteina citoplasmatica di tipo adattatore, coinvolta nell’integrazione dei segnali prossimali ai recettori con risposte trascrizionali e del citoscheletro a valle. È stata collegata alla modulazione di importanti cascate di segnalazione, tra cui Wnt/β-catenina e MAPK/ERK, influenzando la proliferazione e la differenziazione cellulari, nonché programmi trascrizionali dipendenti dal contesto. DAZAP2 si associa inoltre a componenti coinvolti nelle reti regolatorie di RNA e proteine, supportando ruoli nel controllo post-trascrizionale e nelle interazioni proteiche dipendenti dal segnale. Alterazioni dell’espressione di DAZAP2 o del coinvolgimento nelle sue vie di segnalazione sono state riportate in molteplici dataset correlati al cancro, rendendola rilevante per lo studio del rimodellamento oncogeno della segnalazione e delle transizioni di stato cellulare in sistemi modello umani.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO DAZAP2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene DAZAP2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del DAZAP2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto DAZAP2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina DAZAP2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di DAZAP2 per lo studio della segnalazione di DAZAP2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni DAZAP2 critici per la funzione di DAZAP2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di DAZAP2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal DAZAP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal DAZAP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus DAZAP2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal DAZAP2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR DAZAP2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia DAZAP2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio DAZAP2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.