Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
DAZAP2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407056
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- DAZAP2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico DAZAP2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: DAZAP2 Anticuerpo (G-4): sc-515182
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
DAZAP2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407056 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
DAZAP2 (proteína 2 asociada a DAZ) es una proteína citoplasmática tipo adaptador implicada en la integración de señales cercanas al receptor con respuestas transcripcionales y del citoesqueleto aguas abajo. Se ha relacionado con la modulación de importantes cascadas de señalización, incluidas Wnt/β-catenina y MAPK/ERK, influyendo en la proliferación y diferenciación celulares, así como en programas transcripcionales dependientes del contexto. DAZAP2 también se asocia con componentes implicados en redes reguladoras de ARN y proteínas, lo que respalda funciones en el control posranscripcional y en interacciones proteicas dependientes de señales. Se han descrito cambios en la expresión de DAZAP2 o en su participación en vías de señalización en múltiples conjuntos de datos relacionados con cáncer, lo que la hace relevante para estudiar la reconfiguración de la señalización oncogénica y las transiciones de estado celular en sistemas modelo humanos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO DAZAP2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen DAZAP2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del DAZAP2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de DAZAP2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína DAZAP2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en DAZAP2 para la investigación de la señalización de DAZAP2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de DAZAP2 críticos para la función de DAZAP2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de DAZAP2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido DAZAP2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido DAZAP2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus DAZAP2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR DAZAP2 (h) y el plásmido HDR DAZAP2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología DAZAP2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana DAZAP2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.