Plásmido Doble Nickase (h) Cytokeratin 6A: sc-401650-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Cytokeratin 6A consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Cytokeratin 6A (h) y el plásmido de doble nickasa Cytokeratin 6A (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a KRT6A. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Cytokeratin 6A | sc-401650-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Cytokeratin 6A | sc-401650-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KRT6A codifica la citoqueratina 6A, una proteína de filamentos intermedios de tipo II que forma heterodímeros con queratinas de tipo I para construir el citoesqueleto de queratina en epitelios estratificados. La citoqueratina 6A contribuye a la resistencia mecánica, regula la migración de queratinocitos y la remodelación asociada a las heridas, y se conecta con la adhesión desmosomal y con vías de señalización del citoesqueleto que coordinan las respuestas al estrés. Su expresión se induce durante la hiperproliferación y la reparación tisular, lo que vincula KRT6A con programas de diferenciación epitelial y el mantenimiento de la barrera. La desregulación de KRT6A se ha asociado con trastornos de queratinización y patologías epiteliales, por lo que es relevante para estudios de biología epidérmica, organización del citoesqueleto y redes transcripcionales inducidas por estrés.
Cytokeratin 6A El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus KRT6A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de KRT6A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de KRT6A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con KRT6A alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.