Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
CYP21A2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402919-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CYP21A2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CYP21A2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CYP21A2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CYP21A2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CYP21A2 Anticorpo (B-7): sc-518265
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CYP21A2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402919-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CYP21A2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402919-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYP21A2 codifica a enzima do citocromo P450 esteroide 21-hidroxilase, uma mono-oxigenase associada ao retículo endoplasmático, necessária para a esteroidogénese adrenal. Catalisa etapas-chave de hidroxilação nas vias biossintéticas que conduzem ao cortisol e à aldosterona, influenciando assim a homeostase de glicocorticoides e mineralocorticoides. A atividade do CYP21A2 integra-se em redes esteroidogénicas mitocondriais e microssomais, incluindo a transferência de eletrões a partir de NADPH via P450 oxidoredutase e a regulação coordenada de programas de zonagem adrenal. Variantes com perda de função em CYP21A2 estão fortemente associadas à hiperplasia adrenal congénita por deficiência de 21-hidroxilase, tornando-o um alvo central para o estudo da biossíntese de esteroides e dos mecanismos de doença endócrina em modelos de células humanas.
CYP21A2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CYP21A2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CYP21A2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CYP21A2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CYP21A2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.