Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CYP1A2 Plasmide Double Nickase (m): sc-419898-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CYP1A2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CYP1A2 Double Nickase Plasmid (m) e il CYP1A2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Cyp1a2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CYP1A2 Antibody (3B8C1): sc-53614
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CYP1A2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-419898-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CYP1A2 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-419898-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Cyp1a2** codifica l’enzima del citocromo P450 **CYP1A2**, una monoossigenasi microsomiale che ossida una varietà di substrati endogeni e xenobiotici e contribuisce al mantenimento dell’omeostasi chimica. La sua espressione è regolata da programmi trascrizionali attivati da ligandi, in particolare dalla via del recettore degli idrocarburi arilici (**AhR**), che collega le esposizioni ambientali a una capacità inducibile di metabolizzazione dei farmaci. L’attività di CYP1A2 contribuisce all’equilibrio redox epatico e può influenzare la formazione di metaboliti reattivi e le risposte allo stress ossidativo durante la biotrasformazione. Alterazioni della funzione o della regolazione di **Cyp1a2** sono quindi rilevanti per studi sulla suscettibilità ai tossici, sulla variabilità farmacocinetica e sulle interazioni gene–ambiente nei modelli murini.
CYP1A2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Cyp1a2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Cyp1a2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Cyp1a2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Cyp1a2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.