Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CtBP1 Plasmide Double Nickase (h): sc-400667-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CtBP1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CtBP1 Double Nickase Plasmid (h) e il CtBP1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CTBP1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CtBP1 Antibody (G-6): sc-398945
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CtBP1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400667-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CtBP1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400667-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CTBP1 codifica il corepressore trascrizionale CtBP1, un regolatore conservato che collega repressori leganti il DNA a complessi di modifica della cromatina, plasmando i programmi di espressione genica. CtBP1 partecipa al controllo epigenetico attraverso interazioni con deacetilasi istoniche e altri fattori di rimodellamento, influenzando processi quali differenziamento, apoptosi e adattamento metabolico. In quanto coregolatore sensibile a NAD(H), CtBP1 integra lo stato redox cellulare con gli output trascrizionali e contribuisce a vie che includono Wnt/β-catenina e reti trascrizionali associate a TGF-β. Alterazioni dell’attività di CTBP1 sono state associate a una repressione trascrizionale deregolata nella biologia del cancro e a fenotipi del neurosviluppo, sostenendone lo studio nei circuiti di regolazione genica e negli stati cellulari rilevanti per la malattia.
CtBP1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CTBP1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CTBP1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CTBP1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CTBP1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.