Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CRELD2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-407369
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CRELD2 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico CRELD2, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CRELD2 Antibody (A-8): sc-365168
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CRELD2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-407369 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
CRELD2 (cysteine rich with EGF like domains 2) codifica una proteina residente nel reticolo endoplasmatico, contenente ponti disolfuro, implicata nel controllo qualità delle proteine e nell’omeostasi della via secretoria. L’espressione di CRELD2 è comunemente indotta durante lo stress del RE ed è associata alla segnalazione della risposta alle proteine mal ripiegate (UPR), nell’ambito della quale può influenzare la proteostasi, l’equilibrio redox e la secrezione di proteine client. Attraverso questi processi, CRELD2 è stata studiata in contesti di adattamento cellulare allo stress e di segnalazione legata all’infiammazione, e un’espressione alterata è stata riportata in diversi scenari rilevanti per la malattia, inclusi il cancro e fenotipi metabolici o fibrotici. In quanto modulatore di vie associate al RE, CRELD2 rappresenta un nodo accessibile per analizzare come programmi secretori responsivi allo stress plasmino lo stato cellulare e la sopravvivenza.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CRELD2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene CRELD2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del CRELD2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto CRELD2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CRELD2.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di CRELD2 per lo studio della segnalazione di CRELD2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni CRELD2 critici per la funzione di CRELD2
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di CRELD2 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal CRELD2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal CRELD2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus CRELD2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal CRELD2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR CRELD2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia CRELD2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio CRELD2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.