CLEC-2D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412035
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CLEC-2D O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CLEC-2D, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CLEC-2D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-412035 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CLEC2D codifica a CLEC-2D, um ligante do tipo lectina C–like, transmembranar do tipo II, que modula a vigilância imunológica ao interagir com o receptor inibitório KLRB1/CD161 em células NK e em subpopulações de células T. Por meio desse eixo, a CLEC-2D pode influenciar a função efetora citotóxica, a produção de citocinas e a comunicação célula–célula nas interfaces entre o sistema imune e os tecidos. A expressão de CLEC2D é regulada dinamicamente pelo estresse celular e por estados de diferenciação, vinculando-o a vias que governam evasão imune, inflamação e interações tumor–imunidade. Sinalização desregulada de CLEC2D foi relatada em diversas neoplasias e contextos inflamatórios, sustentando seu uso como um ponto mecanístico para estudar a regulação de células NK/T em sistemas humanos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CLEC-2D (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CLEC2D em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CLEC2D, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CLEC2D na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CLEC-2D.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CLEC2D para a investigação da sinalização de CLEC-2D, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CLEC2D críticos para a função CLEC-2D
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CLEC2D para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CLEC-2D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CLEC-2D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CLEC2D. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CLEC-2D Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CLEC-2D (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CLEC2D para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CLEC2D definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.