Plásmido Doble Nickase (h) CIRP: sc-405185-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CIRP consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CIRP (h) y el plásmido de doble nickasa CIRP (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CIRBP. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CIRP Anticuerpo (1C9): sc-293325
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CIRP | sc-405185-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CIRP | sc-405185-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La proteína de unión a ARN inducible por frío (CIRP), codificada por el gen **CIRBP**, es una chaperona de ARN sensible al estrés que modula la estabilidad del ARNm, su traducción y su localización subcelular en respuesta a la hipotermia, la radiación UV y el estrés oxidativo. CIRP participa en redes de regulación postranscripcional que influyen en el control del ciclo celular, la apoptosis y la señalización inflamatoria, incluidas la dinámica de los gránulos de estrés y vías más amplias del metabolismo del ARN. La expresión o localización alteradas de **CIRBP** se han asociado con una adaptación al estrés y respuestas inmunitarias desreguladas, con relevancia para la biología del cáncer, la neuroinflamación y el daño celular relacionado con la isquemia. Como proteína multifuncional de unión a ARN, CIRP constituye un nodo accesible para dilucidar cómo el estrés ambiental remodela los programas de expresión génica a nivel de ARN.
CIRP El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CIRBP en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CIRBP. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CIRBP. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CIRBP alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.