CGGBP1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-407049

Panoramica

CGGBP1 (proteina 1 legante le ripetizioni della tripletta CGG) è un fattore nucleare che si lega al DNA, implicato nella regolazione della trascrizione e nel mantenimento della stabilità del genoma attraverso interazioni con regioni genomiche ricche di sequenze ripetute. È stata collegata al controllo della progressione del ciclo cellulare, a processi associati alla cromatina e alle risposte cellulari allo stress replicativo, favorendo una replicazione del DNA ordinata e la fedeltà mitotica. L’attività di CGGBP1 viene spesso studiata nel contesto della regolazione epigenetica e delle vie di segnalazione del danno al DNA che modellano la proliferazione cellulare e l’adattamento allo stress. Alterazioni dell’espressione o della funzione di CGGBP1 sono state associate a fenotipi di crescita disregolati e a caratteristiche rilevanti per la biologia del cancro, tra cui programmi trascrizionali aberranti e instabilità genomica.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CGGBP1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene CGGBP1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del CGGBP1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto CGGBP1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CGGBP1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di CGGBP1 per lo studio della segnalazione di CGGBP1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni CGGBP1 critici per la funzione di CGGBP1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di CGGBP1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal CGGBP1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal CGGBP1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus CGGBP1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal CGGBP1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR CGGBP1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia CGGBP1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio CGGBP1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.