Cdk3 Plasmide Double Nickase (h): sc-400846-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Cdk3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Cdk3 Double Nickase Plasmid (h) e il Cdk3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CDK3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Cdk3 Antibody (4B6): sc-81836
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Cdk3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400846-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cdk3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400846-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDK3 codifica la chinasi ciclina-dipendente 3 (Cdk3), una chinasi serina/treonina che contribuisce al controllo del ciclo cellulare coordinando interazioni con le cicline ed eventi di fosforilazione associati all’uscita da G0/G1 e alla progressione della fase G1 precoce. L’attività di Cdk3 si interseca con la segnalazione fondamentale CDK–ciclina e con i programmi trascrizionali a valle regolati da RB/E2F che governano la proliferazione e le risposte ai checkpoint. Un’espressione o un’attività deregolata di CDK3 è stata riportata in molteplici contesti tumorali, in cui segnali chinasici alterati possono influenzare crescita, migrazione e vie di adattamento allo stress. Di conseguenza, CDK3 viene spesso studiato per il suo ruolo nelle reti di segnalazione proliferativa e nei determinanti molecolari dei fenotipi associati ai tumori.
Cdk3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CDK3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CDK3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CDK3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CDK3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.