CD163 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-429989

Descripción general

Cd163 codifica CD163, un receptor depurador (scavenger) enriquecido en macrófagos y monocitos que se une a complejos hemoglobina–haptoglobina y favorece su endocitosis y eliminación, vinculando el reciclaje de hierro con programas inflamatorios de fase de resolución. CD163 participa en la regulación de la inmunidad innata mediante el tráfico endocítico y la modulación de las respuestas de citocinas, y se asocia comúnmente con fenotipos de macrófagos activados alternativamente en contextos de reparación tisular. En modelos murinos, las poblaciones mieloides CD163 positivas se utilizan para estudiar microambientes inflamatorios, polarización de macrófagos y el diálogo cruzado mieloide–estromal en condiciones inflamatorias crónicas y fibróticas. La expresión alterada de Cd163 también se ha aprovechado como marcador de estados de macrófagos relevantes para la enfermedad en escenarios como la infección, la inflamación metabólica y la biología mieloide asociada a tumores.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CD163 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cd163 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cd163 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cd163 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CD163.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cd163 para la investigación de la señalización de CD163, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Cd163 críticos para la función de CD163
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cd163 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CD163 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CD163 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cd163. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CD163 (m) y el plásmido HDR CD163 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cd163 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cd163 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.