CD14 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-400344-NIC

CD14는 글리코실포스파티딜이노시톨(GPI)로 막에 고정된 패턴 인식 수용체를 암호화하며, 주로 단핵구, 대식세포, 호중구에서 발현된다. 이 수용체는 세균성 지질다당(LPS)과 기타 미생물 리간드에 대한 공동수용체로 기능한다. CD14는 리간드를 TLR4/MD-2 복합체에 제시함으로써 NF-κB 및 MAPK 경로를 활성화하는 선천면역 신호를 증폭시키고, 그 결과 사이토카인과 케모카인 생성이 유도된다. CD14 의존적 감지는 엔도사이토시스성 수송과도 연계되며, 인플라마좀 관련 염증 프로그램에도 기여한다. CD14 신호의 이상 조절과 가용성 CD14의 shedding(유리)은 패혈증의 병태생리, 만성 염증 상태, 심장대사 및 신경염증성 질환 기전과 연관되는 것으로 알려져 있어, CD14는 숙주–병원체 상호작용과 면역 활성화를 연구하는 데서 자주 표적이 된다.

CD14 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 CD14 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 CD14 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 CD14의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, CD14 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.