CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-400648-KO-2

Descripción general

CNR1 codifica el receptor cannabinoide 1 (CB1), un receptor acoplado a proteína G predominantemente neuronal que transduce señales endocannabinoides para regular la liberación de neurotransmisores y la plasticidad sináptica. CB1 se acopla principalmente a proteínas Gi/o para inhibir la adenilil ciclasa, modular la señalización de AMPc/PKA y activar las vías MAPK/ERK, a la vez que influye en la actividad de canales iónicos y en la dinámica presináptica del calcio. Mediante estos mecanismos, CB1 contribuye al control, a nivel de circuitos, de la recompensa, la nocicepción, el apetito, la respuesta al estrés y la neuroinflamación. La desregulación de la señalización de CNR1 se ha asociado con fenotipos neuropsiquiátricos y rasgos metabólicos, lo que respalda su uso como un nodo molecular para estudiar la señalización cerebro–cuerpo y el control homeostático.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 (h2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CNR1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CNR1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CNR1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CNR1 para la investigación de la señalización de CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CNR1 críticos para la función de CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CNR1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CNR1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 (h) y el plásmido HDR CB1/Cannabinoid Receptor 1/CNR1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CNR1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CNR1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.