Plásmido Doble Nickase (h) CaM III: sc-400953-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CaM III consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CaM III (h) y el plásmido de doble nickasa CaM III (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CALM3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CaM III | sc-400953-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CaM III | sc-400953-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano **CALM3** codifica la **calmodulina III (CaM III)**, un sensor de **Ca2+** expresado de manera ubicua que se une a diversos blancos para convertir señales transitorias de calcio en respuestas celulares coordinadas. La CaM III regula procesos clave, incluida la señalización de **CaMK** y **calcineurina/NFAT**, el metabolismo de nucleótidos cíclicos y la compuerta de canales iónicos, influyendo así en el acoplamiento excitación–contracción, la actividad sináptica, la secreción y la progresión del ciclo celular. Mediante la modulación de programas de fosforilación y transcripción, las vías dependientes de calmodulina moldean la función mitocondrial y las respuestas al estrés, y se investigan con frecuencia en estudios de arritmogénesis, fenotipos del neurodesarrollo y señalización proliferativa. Por tanto, las alteraciones en el manejo del calcio y la disfunción de la red de calmodulina son relevantes para modelos mecanísticos de enfermedad cardiovascular y neurológica, así como para el mapeo de vías en diversos tipos celulares.
CaM III El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CALM3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CALM3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CALM3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CALM3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.