Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CA VI Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419456
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CA VI El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CA VI, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CA VI Anticuerpo (H-8): sc-514761
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CA VI Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419456 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Car6 codifica la anhidrasa carbónica VI (CA VI), una metaloenzima de zinc secretada que cataliza la hidratación reversible del CO₂ a bicarbonato y protones, favoreciendo el tamponamiento del pH extracelular y la homeostasis del bicarbonato en entornos glandulares y mucosos. Al modular la dinámica de protones, la CA VI contribuye a procesos relacionados con el transporte iónico epitelial y el control del pH del microambiente, lo que puede influir en la actividad enzimática, las interacciones con la matriz y la señalización celular. En sistemas murinos, la expresión de Car6 se utiliza con frecuencia para estudiar la regulación del equilibrio ácido-base extracelular dependiente de anhidrasa carbónica en tejidos secretorios. La desregulación del control del pH es ampliamente relevante en modelos de inflamación, remodelación tisular y estrés metabólico, lo que convierte a Car6 en una diana útil para estudios mecanísticos de fenotipos sensibles al pH.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CA VI (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Car6 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Car6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Car6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CA VI.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Car6 para la investigación de la señalización de CA VI, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Car6 críticos para la función de CA VI
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Car6 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CA VI CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CA VI CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Car6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CA VI (m) y el plásmido HDR CA VI (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Car6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Car6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.