Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
BSEP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400742-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BSEPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase BSEP (h) e o Plasmídeo Double Nickase BSEP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ABCB11. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BSEP Anticorpo (F-6): sc-74500
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BSEP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400742-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BSEP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400742-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABCB11 codifica a bomba de exportação de sais biliares (BSEP), um transportador canalicular da família ABC (ATP-binding cassette) que promove o efluxo de ácidos biliares, dependente de ATP, dos hepatócitos para a bile. A atividade da BSEP é central para a circulação entero-hepática e para a homeostase hepática dos ácidos biliares, atuando em coordenação com a síntese e a conjugação de ácidos biliares, bem como com vias de sinalização como o controlo por retroalimentação regulado por FXR. A perturbação da função de ABCB11 altera a composição dos ácidos biliares e a sua acumulação intracelular, comprometendo a integridade das membranas, as respostas ao stress oxidativo e a sinalização inflamatória nos sistemas hepatobiliares. A variação genética ou a redução da expressão de ABCB11 está associada a fenótipos colestáticos e oferece um ponto de entrada mecanístico para estudar a biologia dos transportadores e a patologia hepática impulsionada por ácidos biliares.
BSEP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ABCB11 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ABCB11. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ABCB11. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ABCB11 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.