beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β₁-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419026

Visão geral

Adrb1 codifica o receptor β1-adrenérgico murino (ADRB1/β1-AR), um receptor acoplado à proteína G (GPCR) que se acopla principalmente à Gs para estimular a adenilil ciclase, elevar o cAMP e ativar a sinalização dependente de PKA. No coração e em outros tecidos excitáveis, o β1-AR regula a cronotropia, a inotropia e a adaptação metabólica por meio da fosforilação de canais iônicos e de proteínas envolvidas no manejo de Ca2+, com crosstalk adicional de vias via dessensibilização mediada por GRK/arrestina e internalização do receptor. Sinalização β-adrenérgica desregulada e alterações na expressão ou na função de ADRB1 estão implicadas em modelos de respostas ao estresse cardiovascular, remodelamento associado à insuficiência cardíaca e arritmogênese, além de influenciarem a lipólise em adipócitos e o controle neuro-humoral. Como um nó central na sinalização por catecolaminas, o ADRB1 é amplamente utilizado para investigar a dinâmica de sinalização de GPCRs, o tráfego de receptores e programas transcricionais a jusante.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Adrb1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Adrb1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Adrb1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Adrb1 para a investigação da sinalização de beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Adrb1 críticos para a função beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Adrb1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Adrb1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Adrb1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Adrb1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.