BAI-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406051

Visão geral

ADGRB2 codifica o receptor acoplado à proteína G de adesão BAI-2 (inibidor de angiogênese específico do cérebro 2), um receptor de membrana multidomínio enriquecido no sistema nervoso e implicado em interações célula–célula e célula–matriz. Como um GPCR de adesão, o BAI-2 integra sinais extracelulares a programas de sinalização intracelular que moldam a organização do citoesqueleto, a dinâmica de membrana e a comunicação celular, contribuindo para processos como o desenvolvimento neuronal e a homeostase tecidual. A desregulação da sinalização de GPCRs de adesão tem sido associada a microambientes angiogênicos e inflamatórios alterados e a mudanças na motilidade celular e em estados de diferenciação. Assim, ADGRB2/BAI-2 é estudado em contextos que incluem a neurobiologia e redes de sinalização associadas a tumores, nas quais vias dependentes de adesão influenciam fenótipos relevantes para doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BAI-2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ADGRB2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ADGRB2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ADGRB2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BAI-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ADGRB2 para a investigação da sinalização de BAI-2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ADGRB2 críticos para a função BAI-2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ADGRB2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo BAI-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo BAI-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ADGRB2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo BAI-2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR BAI-2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ADGRB2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ADGRB2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.