BAI-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406051

Descripción general

ADGRB2 codifica el receptor acoplado a proteína G de adhesión BAI-2 (inhibidor 2 de la angiogénesis específico del cerebro), un receptor de membrana multidominio enriquecido en el sistema nervioso e implicado en interacciones célula–célula y célula–matriz. Como GPCR de adhesión, BAI-2 integra señales extracelulares con programas de señalización intracelular que modelan la organización del citoesqueleto, la dinámica de membrana y la comunicación celular, contribuyendo a procesos como el desarrollo neuronal y la homeostasis tisular. La señalización desregulada de los GPCR de adhesión se ha relacionado con microambientes angiogénicos e inflamatorios alterados y con cambios en la motilidad celular y en los estados de diferenciación. En consecuencia, ADGRB2/BAI-2 se estudia en contextos que incluyen la neurobiología y las redes de señalización asociadas a tumores, donde las vías dependientes de la adhesión influyen en fenotipos relevantes para la enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO BAI-2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ADGRB2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ADGRB2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ADGRB2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BAI-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ADGRB2 para la investigación de la señalización de BAI-2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ADGRB2 críticos para la función de BAI-2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ADGRB2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido BAI-2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido BAI-2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ADGRB2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BAI-2 (h) y el plásmido HDR BAI-2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ADGRB2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ADGRB2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.