ARID3A Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h2): sc-404552-LAC-2

O gene humano ARID3A codifica um fator de transcrição ligante de DNA da família do domínio de interação com regiões ricas em AT, que regula a acessibilidade da cromatina e programas de expressão gênica específicos de tipos celulares. O ARID3A está implicado no desenvolvimento e na ativação de células B, na modulação da transcrição responsiva ao interferon e na coordenação de redes transcricionais ligadas à diferenciação e à proliferação. A expressão desregulada do ARID3A e a atividade regulatória alterada têm sido associadas à disfunção imune e a estados transcricionais relacionados à malignidade, incluindo contextos relevantes para cânceres hematológicos e fenótipos autoimunes. A edição gênica de ARID3A possibilita estudos mecanísticos do controle entre potenciadores e promotores, do comprometimento de linhagem e das saídas de sinalização impulsionadas por citocinas, apoiando triagens de genômica funcional e o mapeamento de vias em modelos celulares humanos.

As Partículas de Ativação Lentivirais ARID3A (h2) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de ARID3A numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais ARID3A (h2) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição ARID3A, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de ARID3A. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo ARID3A e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.