Plasmide Double Nickase (m) ARID1A: sc-430047-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) ARID1A correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ARID1A Double Nickase (m) et le plasmide ARID1A Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Arid1a. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ARID1A Antibody (PSG3): sc-32761
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) ARID1A | sc-430047-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) ARID1A | sc-430047-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Chez la souris, Arid1a code ARID1A, une sous-unité de liaison à l’ADN du complexe de remodelage de la chromatine SWI/SNF (BAF) dépendant de l’ATP, qui module le positionnement des nucléosomes afin de réguler des programmes transcriptionnels. ARID1A contribue à coordonner l’accessibilité des enhancers et des promoteurs, influençant le contrôle du cycle cellulaire, la spécification de lignée, les réponses aux dommages de l’ADN et la stabilité du génome via des effets étendus sur l’architecture de la chromatine. Dans les systèmes mammifères, une altération de la fonction d’ARID1A est fortement associée à une dérégulation du contrôle épigénétique et à une différenciation déficiente, ce qui en fait un nœud clé pour étudier les changements de prolifération et de signalisation de réponse au stress induits par la chromatine. Arid1a est donc largement utilisé dans des modèles murins pour explorer les voies de remodelage de la chromatine et leurs rôles dans des phénotypes cellulaires pertinents pour les maladies.
ARID1A Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Arid1a dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Arid1a. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Arid1a. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Arid1a.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.