Aquaporin 7/AQP7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419178
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Aquaporin 7/AQP7 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Aquaporin 7/AQP7, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Aquaporin 7/AQP7 Anticorpo (D-12): sc-376407
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Aquaporin 7/AQP7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419178 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Aqp7 codifica a aquaporina 7 (AQP7), uma aquagliceroporina que facilita o transporte transmembranar de água e de pequenos solutos neutros, como o glicerol. Em adipócitos de camundongos, a AQP7 ajuda a regular o efluxo de glicerol durante a lipólise, influenciando o uso de glicerol, o armazenamento de triglicerídeos e o balanço energético sistêmico. Sua atividade se integra a programas de sinalização metabólica, incluindo vias lipolíticas conduzidas por cAMP/PKA e redes mais amplas de homeostase lipídica. Alterações na expressão ou na função da AQP7 têm sido associadas a fenótipos relevantes para obesidade, resistência à insulina e acúmulo de lipídios hepáticos, sustentando seu uso como um nó mecanístico em modelos de doenças metabólicas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Aquaporin 7/AQP7 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Aqp7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Aqp7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Aqp7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Aquaporin 7/AQP7.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Aqp7 para a investigação da sinalização de Aquaporin 7/AQP7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Aqp7 críticos para a função Aquaporin 7/AQP7
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Aqp7 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Aquaporin 7/AQP7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Aquaporin 7/AQP7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Aqp7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Aquaporin 7/AQP7 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Aquaporin 7/AQP7 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Aqp7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Aqp7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.