Plásmido Doble Nickase (m) apolipoprotein E/apoE: sc-419167-NIC

El gen murino **Apoe** codifica la apolipoproteína E (apoE), una proteína secretada de unión a lípidos que media el transporte de colesterol y triglicéridos al asociarse con partículas de lipoproteínas e interactuar con miembros de la familia de receptores de LDL. La apoE regula la captación de lipoproteínas, el manejo de lípidos en macrófagos y la señalización inflamatoria, integrando vías como el aclaramiento de lipoproteínas, el transporte reverso de colesterol y las respuestas microgliales en el sistema nervioso central. En modelos murinos, el estado de **Apoe** influye de forma marcada en la biología de la placa aterosclerótica, el metabolismo lipídico hepático y fenotipos neuroinmunes vinculados a la deposición de amiloide y al mantenimiento sináptico. Estas funciones convierten a **Apoe** en un nodo central para estudiar mecanismos de enfermedad cardiometabólica y el crosstalk entre lípidos e inmunidad relevante para la neurodegeneración in vivo y en células primarias.

apolipoprotein E/apoE El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Apoe en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Apoe. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Apoe. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Apoe alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.