Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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apoD Plasmide Double Nickase (h): sc-402012-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- apoD Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il apoD Double Nickase Plasmid (h) e il apoD Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira APOD. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: apoD Antibody (C-1): sc-373965
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
apoD Plasmide Double Nickase (h) | sc-402012-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
apoD Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402012-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
APOD codifica l'apolipoproteina D (apoD), una glicoproteina secreta della famiglia delle lipocaline che lega e trasporta piccoli ligandi idrofobici, come l'acido arachidonico e molecole correlate agli steroidi. apoD partecipa al traffico lipidico extracellulare e all'omeostasi redox, influenzando la composizione lipidica delle membrane, le risposte allo stress ossidativo e la segnalazione infiammatoria in tessuti tra cui cervello e sistema vascolare. La sua espressione è regolata in contesti di stress cellulare e invecchiamento, collegando APOD a vie che modulano la perossidazione lipidica e la proteostasi. Livelli alterati di apoD sono stati riportati in contesti di malattie neurodegenerative e metaboliche, a sostegno del suo impiego come marcatore meccanicistico nella ricerca sulle patologie associate ai lipidi.
apoD Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus APOD nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di APOD. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di APOD. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con APOD interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.