Angptl2 Particelle di Attivazione Lentivirale (h): sc-406130-LAC

Il gene umano **ANGPTL2** codifica la proteina angiopoietin-like 2 (Angptl2), una glicoproteina secreta che modula la comunicazione cellula-cellula all’interno di microambienti vascolari, adiposi e stromali. Angptl2 è stata associata alla regolazione dell’attivazione endoteliale, del rimodellamento della matrice extracellulare, del reclutamento dei leucociti e della segnalazione infiammatoria cronica, intersecando vie che influenzano l’angiogenesi e l’omeostasi metabolica. L’alterazione dell’espressione di **ANGPTL2** è frequentemente studiata in contesti di infiammazione associata all’obesità, insulino-resistenza, processi aterosclerotici e rimodellamento stromale associato ai tumori. In quanto fattore circolante e del microambiente, Angptl2 rappresenta un nodo accessibile per analizzare come ligandi secreti plasmino l’infiammazione tissutale e le dinamiche vascolari.

Le particelle di attivazione lentivirale Angptl2 (h) rispondono a questa esigenza incapsulando il sistema completo di attivazione trascrizionale del mediatore di attivazione sinergica (SAM) in particelle lentivirali ad alto titolo pronte per la trasduzione, consentendo un'efficiente sovraregolazione di ANGPTL2 in una gamma più ampia di tipi di cellule umane.

Le particelle di attivazione lentivirale Angptl2 (h) veicolano tutti i componenti funzionali del sistema del mediatore di attivazione sinergica (SAM) tramite trasduzione lentivirale. Il sistema comprende tre preparati di particelle co-trasdotti nelle cellule bersaglio: uno che codifica per dCas9 cataliticamente inattivo (mutazioni D10A e N863A) fuso al dominio di transattivazione VP64 con un gene di resistenza alla blasticidina; una che codifica la proteina di fusione MS2-p65-HSF1 con un gene di resistenza all'igromicina; e una che codifica un sgRNA di 20 nt specifico per il bersaglio fuso a due aptameri di RNA MS2 con un gene di resistenza alla puromicina. A seguito della trasduzione lentivirale e dell'integrazione genomica dei cassetti di espressione, i componenti del SAM vengono espressi in modo stabile e si assemblano nel locus bersaglio all'interno della regione promotrice prossimale a monte del sito di inizio della trascrizione ANGPTL2, dove VP64, p65 e HSF1 agiscono in modo cooperativo per reclutare il machinery trascrizionale endogeno e guidare una sovraregolazione sostenuta dell'espressione endogena di Angptl2. L'uso di dCas9 inattivo nei confronti delle nucleasi evita l'introduzione di rotture del DNA a doppio filamento e preserva il locus genomico nativo ANGPTL2 e l'architettura regolatoria.

Il formato lentivirale offre diversi vantaggi pratici: l'integrazione genomica stabile supporta l'attivazione ereditaria attraverso le divisioni cellulari; le preparazioni di particelle ad alto titolo eliminano la necessità di una produzione virale interna; e la compatibilità con tipi di cellule primarie, non in divisione e resistenti alla trasfezione amplia l'accessibilità sperimentale. Il successo della trasduzione può essere confermato e potenziato attraverso una selezione antibiotica tripla utilizzando puromicina, igromicina e blasticidina.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.