Plásmido Doble Nickase (m) Androgen Receptor: sc-419181-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Androgen Receptor consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Androgen Receptor (m) y el plásmido de doble nickasa Androgen Receptor (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Ar. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Androgen Receptor Anticuerpo (AN1-15): sc-56824
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Androgen Receptor | sc-419181-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen Ar de ratón codifica el receptor de andrógenos (AR), un receptor nuclear activado por ligando que se une a andrógenos y regula programas transcripcionales que controlan el desarrollo, la fisiología reproductiva y la homeostasis tisular. Tras su activación, el AR se transloca al núcleo, se une a elementos de respuesta a andrógenos y coopera con remodeladores de cromatina y correguladores para modular la expresión génica en vías que regulan la progresión del ciclo celular, la diferenciación y el metabolismo. La señalización del AR se entrecruza con las redes PI3K/AKT, MAPK y Wnt/β-catenina, integrando señales hormonales con respuestas de crecimiento y estrés. La actividad desregulada del AR y la expresión alterada del receptor se utilizan ampliamente como modelos mecanísticos en biología sensible a hormonas, incluidos estudios de trastornos reproductivos y tumorogénesis impulsada por el sistema endocrino en modelos murinos.
Androgen Receptor El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Ar en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Ar. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Ar. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Ar alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.