Amylase 2a CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400533

개요

AMY2A는 췌장 α-아밀레이스 2A를 암호화하며, 이는 분비되는 가수분해효소로서 α-1,4-글리코시드 결합을 절단해 말토스와 올리고당을 생성함으로써 식이 전분과 글리코겐 분해를 시작합니다. 외분비 췌장 효소 프로그램의 일부로서 아밀레이스 2a는 소화 대사에 기여하며, ER/골지 수송과 자극-연동 효소 분비를 포함한 분비 경로 과정 및 선방세포(acinar cell) 분화 과정에서 조절됩니다. 아밀레이스 발현 또는 활성의 변화는 췌장 외분비 기능을 반영하는 분자적 지표로 사용되며, 선방세포 항상성이 교란되는 췌장 염증 및 췌장 질환 맥락에서 자주 분석됩니다. AMY2A는 또한 선방세포 정체성, 스트레스 반응, 소화 효소 유전자 조절을 연구하는 데서 표지자로 활용됩니다.

Amylase 2a CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 AMY2A 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 AMY2A 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 AMY2A의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Amylase 2a 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Amylase 2a 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 AMY2A 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Amylase 2a 기능에 중요한 AMY2A 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 AMY2A 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Amylase 2a CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Amylase 2a CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 AMY2A 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Amylase 2a HDR 플라스미드 (h) 및 Amylase 2a HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 AMY2A 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 AMY2A 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.