ALKB Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408412-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ALKBO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ALKB (h) e o Plasmídeo Double Nickase ALKB (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ALKBH1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ALKB Anticorpo (F-4): sc-374301
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ALKB Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-408412-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ALKB Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-408412-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ALKBH1 codifica uma dioxigenase dependente de Fe(II)/2-oxoglutarato implicada na desmetilação oxidativa de ácidos nucleicos e na regulação de processos associados à cromatina. A proteína tem sido relacionada ao reparo de DNA e a respostas ao estresse associado à replicação, e contribui para a manutenção da estabilidade do genoma por meio da modulação de modificações de bases. A atividade de ALKBH1 cruza vias que governam a regulação epigenética, o metabolismo de ácidos nucleicos mitocondriais e nucleares e a adaptação celular ao estresse genotóxico. A desregulação da expressão ou da função de ALKBH1 tem sido associada a programas de proliferação alterados e a fenótipos relevantes para tumores, tornando-a um alvo útil para estudos mecanísticos em biologia do câncer e sinalização de dano ao DNA.
ALKB O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ALKBH1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ALKBH1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ALKBH1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ALKBH1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.