Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Ajuba Plasmide Double Nickase (h): sc-403298-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Ajuba Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Ajuba Double Nickase Plasmid (h) e il Ajuba Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira AJUBA. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Ajuba Antibody (B-3): sc-398008
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Ajuba Plasmide Double Nickase (h) | sc-403298-NIC | 20 µg | $410.00 |
AJUBA codifica Ajuba, una proteina scaffold contenente domini LIM che si localizza nelle giunzioni aderenti e nel nucleo, dove integra segnali che controllano l’adesione cellulare, la dinamica del citoscheletro e la meccanotrasduzione. Ajuba partecipa a vie di segnalazione collegate al pathway Hippo/YAP, alla segnalazione MAPK/ERK e alla regolazione di programmi trascrizionali attraverso interazioni con molteplici chinasi e regolatori della trascrizione. Attraverso questi ruoli, AJUBA contribuisce a coordinare l’inibizione da contatto, l’organizzazione epiteliale e l’espressione genica in risposta allo stress. Un’espressione o una funzione deregolata di AJUBA è stata associata ad alterazioni del comportamento migratorio e dei programmi proliferativi osservati nel cancro e in altri disturbi che coinvolgono disfunzioni di barriera e un rimodellamento tissutale aberrante.
Ajuba Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus AJUBA nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di AJUBA. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di AJUBA. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con AJUBA interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.