Plasmide Double Nickase (h) ACSL5: sc-403876-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ACSL5 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ACSL5 Double Nickase (h) et le plasmide ACSL5 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ACSL5. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ACSL5 Antibody (A-2): sc-365478
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ACSL5 | sc-403876-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ACSL5 | sc-403876-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACSL5 code une synthétase d’acyl‑CoA à longue chaîne qui active les acides gras en les convertissant en thioesters d’acyl‑CoA, une étape d’entrée clé pour l’utilisation et le remodelage des lipides. En orientant les substrats vers la β‑oxydation mitochondriale, la synthèse des triglycérides et le remodelage des phospholipides, ACSL5 influence l’équilibre énergétique cellulaire et la composition des membranes. Son activité s’inscrit au carrefour des réponses au stress métabolique et des voies de signalisation dépendantes des lipides qui régulent la prolifération, l’apoptose et les programmes inflammatoires. Une expression ou une fonction dérégulée d’ACSL5 a été associée à des perturbations de l’homéostasie lipidique dans des contextes de maladies métaboliques et a été étudiée en lien avec le métabolisme des cellules tumorales et des décisions de destinée cellulaire dépendantes des mitochondries.
ACSL5 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ACSL5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ACSL5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ACSL5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ACSL5.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.