Plásmido Doble Nickase (m) ABHD15: sc-426589-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)ABHD15 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ABHD15 (m) y el plásmido de doble nickasa ABHD15 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Abhd15. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) ABHD15 | sc-426589-NIC | 20 µg | $410.00 |
Abhd15 codifica ABHD15, una proteína que contiene un dominio de α/β-hidrolasa implicada en la regulación metabólica y en la señalización sensible a la insulina, con funciones descritas en la modulación de la actividad de los adipocitos y la homeostasis energética. En sistemas murinos, ABHD15 se ha relacionado con vías que influyen en el manejo de la glucosa y el metabolismo de los lípidos, incluyendo interacciones con la señalización de AMPc regulada por fosfodiesterasas que pueden moldear la adipogénesis y la sensibilidad a la insulina. Por lo tanto, la alteración de la expresión de Abhd15 es relevante para estudios mecanísticos de fenotipos metabólicos como la resistencia a la insulina asociada a la obesidad y el remodelado inflamatorio relacionado en el tejido adiposo. Estas características hacen de ABHD15 una diana útil para desentrañar redes génicas que coordinan la detección de nutrientes, la señalización intracelular por segundos mensajeros y la adaptación metabólica sistémica.
ABHD15 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Abhd15 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Abhd15. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Abhd15. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Abhd15 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.