Plásmido Doble Nickase (h) ABC1: sc-401086-NIC

ABCA1 (ABC1) es un transportador de la familia ABC (cassette de unión a ATP) que media el eflujo celular de colesterol y fosfolípidos hacia la apolipoproteína A-I, favoreciendo la formación de HDL naciente y el transporte inverso de colesterol. Al regular la homeostasis lipídica, ABCA1 influye en la composición de la membrana, la organización de las balsas lipídicas y procesos de señalización posteriores vinculados al manejo del colesterol por macrófagos y a las respuestas inflamatorias. La actividad de ABCA1 se integra con programas transcripcionales regulados por LXR/RXR y con vías más amplias que controlan la detección de esteroles y el metabolismo de lipoproteínas. Las alteraciones genéticas o funcionales de ABCA1 se asocian con fenotipos de dislipidemia y con cambios en la biología relacionada con la aterogénesis, lo que lo convierte en una diana clave para estudios mecanísticos del transporte de lípidos y de las vías de enfermedad cardiometabólica.

ABC1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ABCA1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ABCA1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ABCA1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ABCA1 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.