ABC1 Plasmide Double Nickase (h): sc-401086-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ABC1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ABC1 Double Nickase Plasmid (h) e il ABC1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ABCA1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ABC1 Antibody (AC10): sc-53482
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ABC1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401086-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ABC1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401086-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABCA1 (ABC1) è un trasportatore della famiglia ATP-binding cassette che media l’efflusso cellulare di colesterolo e fosfolipidi verso l’apolipoproteina A-I, favorendo la formazione delle HDL nascenti e il trasporto inverso del colesterolo. Regolando l’omeostasi lipidica, ABCA1 influenza la composizione della membrana, l’organizzazione dei lipid raft e i processi di segnalazione a valle legati alla gestione del colesterolo nei macrofagi e alle risposte infiammatorie. L’attività di ABCA1 si interseca con programmi trascrizionali regolati da LXR/RXR e con vie più ampie che controllano il sensing degli steroli e il metabolismo delle lipoproteine. Alterazioni genetiche o funzionali di ABCA1 sono associate a fenotipi di dislipidemia e a cambiamenti nella biologia legata all’aterogenesi, rendendolo un bersaglio chiave per studi meccanicistici sul trasporto lipidico e sulle vie della malattia cardiometabolica.
ABC1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ABCA1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ABCA1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ABCA1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ABCA1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.