A20/TNFAIP3 Lentiviral Activation Particles (m): sc-423436-LAC

Tnfaip3 は、ユビキチン編集酵素である A20/TNFAIP3 をコードしており、TNF 受容体、Toll 様受容体、IL-1 受容体からの入力の下流で NF-κB および MAPK 経路の活性化を抑制することで、炎症性シグナル伝達を終息させます。A20 は、脱ユビキチン化活性とユビキチンリガーゼ活性を協調させ、RIPK1、TRAF6、NEMO などの主要アダプター上の K63 結合および M1 結合型ユビキチン足場を調節し、サイトカイン産生と細胞死シグナルを制御します。マウス系では、A20 活性の変化が自然免疫および獲得免疫の恒常性を乱し、骨髄系・リンパ系コンパートメントにおける応答に影響を与えるとともに、組織炎症の形成にも関与します。これらの機能により、Tnfaip3 は炎症生物学、自己免疫に関連する機構、ならびに NF-κB 制御が中心となる腫瘍性シグナル伝達の文脈で、共通の要所（ノード）として研究されることが多い遺伝子です。

A20/TNFAIP3 レンチウイルス活性化粒子（m）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なTnfaip3の発現上昇を可能にします。

A20/TNFAIP3 レンチウイルス活性化粒子（m）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、Tnfaip3転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性A20/TNFAIP3の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のTnfaip3ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。