非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
20S 蛋白酶体 β5 (A-10): sc-393931. Jurkat (A), HeLa (B), IFN-γ 处理过的 HeLa (C), MIA PaCa-2 (D) 和 Hep G2 (E) 全细胞裂解液中 20S 蛋白酶体 β5 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
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20S Proteasome β5 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-402449
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- 20S Proteasome β5 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在20S Proteasome β5基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：20S Proteasome β5: sc-393931，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
20S Proteasome β5 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-402449 | 20 µg | $397.00 |
概述
PSMB5 编码 20S 核心蛋白酶体的 β5 催化亚基，提供类胰凝乳蛋白酶样活性，是泛素–蛋白酶体系统进行 ATP 依赖性蛋白降解所必需的。该蛋白水解通路参与调控蛋白质质量控制、用于 MHC I 类呈递的抗原加工，以及关键细胞周期与应激反应调控因子的周转。蛋白酶体功能异常与蛋白稳态失衡、氧化应激与内质网应激信号改变，以及 NF-κB 与凋亡通路的变化有关。PSMB5 也常在增殖信号以及对蛋白酶体抑制的反应等背景下被研究，其中 β5 活性可影响细胞对相关处理的敏感性与耐受表型。
20S Proteasome β5 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中PSMB5基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对PSMB5基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏PSMB5开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使20S Proteasome β5蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建PSMB5缺失的细胞模型，用于20S Proteasome β5信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 20S Proteasome β5 功能至关重要的 PSMB5 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 PSMB5 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 20S Proteasome β5 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 20S Proteasome β5 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 PSMB5 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 20S Proteasome β5 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 20S Proteasome β5 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由PSMB5同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定PSMB5靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。