Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (m) α1A-AR: sc-419021-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) α1A-AR correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide α1A-AR Double Nickase (m) et le plasmide α1A-AR Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Adra1a. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: α1A-AR Antibody (4D8): sc-100291
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) α1A-AR | sc-419021-NIC | 20 µg | $410.00 |
Adra1a code le récepteur adrénergique α1A de la souris (α1A-AR), un récepteur couplé aux protéines G qui s’associe principalement à Gq/11 pour stimuler la signalisation via la phospholipase C, la production d’inositol phosphates, la mobilisation du Ca2+ intracellulaire et l’activation de la PKC. Par ces voies, α1A-AR régule le tonus du muscle lisse, la réactivité vasculaire et la neurotransmission sympathique, et peut activer en aval la signalisation MAPK/ERK afin d’influencer la prolifération cellulaire et les réponses au stress. Dans le système nerveux et les organes périphériques, l’activité d’Adra1a intègre les signaux catécholaminergiques avec la fonction des canaux ioniques et la machinerie contractile. Une signalisation adrénergique dérégulée impliquant α1A-AR a été associée à des phénotypes cardiovasculaires et autonomes, ainsi qu’à des rôles dépendants du contexte en neurophysiologie, ce qui fait d’Adra1a une cible utile pour disséquer les réseaux de signalisation pilotés par les GPCR.
α1A-AR Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Adra1a dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Adra1a. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Adra1a. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Adra1a.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.