Plasmide Double Nickase (h) Yes: sc-400261-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Yes correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Yes Double Nickase (h) et le plasmide Yes Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant YES1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Yes Antibody (C-10): sc-46674
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Yes | sc-400261-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Yes | sc-400261-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
YES1 code pour Yes, une tyrosine kinase non réceptrice de la famille Src, qui relaie des signaux issus des récepteurs à activité tyrosine kinase, des intégrines et des récepteurs immunitaires vers des effecteurs en aval contrôlant la prolifération, l’adhésion, la dynamique du cytosquelette et la survie. Yes participe à des voies telles que la signalisation des adhérences focales, MAPK/ERK, PI3K–AKT et la régulation de STAT, reliant des signaux extracellulaires à des programmes transcriptionnels et métaboliques. Une activité aberrante de YES1 ou un gain du nombre de copies a été associé à une altération des réseaux de signalisation oncogéniques, notamment des modifications de la migration cellulaire et un remodelage de kinases lié à la résistance dans de multiples contextes tumoraux. En tant que nœud de signalisation, YES1 est fréquemment étudié pour son rôle dans la communication croisée des voies dépendante de la phosphorylation et la régulation de la transduction du signal à proximité de la membrane.
Yes Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus YES1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de YES1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de YES1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de YES1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.