Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) XRCC4: sc-430821-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) XRCC4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide XRCC4 Double Nickase (m) et le plasmide XRCC4 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Xrcc4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: XRCC4 Antibody (G-10): sc-365118
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) XRCC4 | sc-430821-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Xrcc4** code **XRCC4**, une protéine d’échafaudage essentielle de la voie de jonction d’extrémités non homologues (NHEJ), qui répare les cassures double brin de l’ADN générées par les rayonnements ionisants, le stress oxydant et des événements de recombinaison programmée. XRCC4 forme un complexe fonctionnel avec la ligase IV de l’ADN et interagit avec XLF/NHEJ1 afin d’aligner puis de ligaturer les extrémités d’ADN rompues, préservant ainsi la stabilité du génome et soutenant une progression correcte du cycle cellulaire. La perturbation de la jonction d’extrémités dépendante de XRCC4 compromet l’intégrité chromosomique et accroît la sensibilité au stress génotoxique, reliant la fonction de XRCC4 aux mécanismes à l’origine de l’instabilité génomique associée au cancer. **Xrcc4** est également pertinent pour les études du développement du système immunitaire, car la NHEJ est requise pour la recombinaison V(D)J et la diversification des gènes des récepteurs antigéniques.
XRCC4 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Xrcc4 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Xrcc4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Xrcc4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Xrcc4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.