WRN Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401860-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- WRNO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase WRN (h) e o Plasmídeo Double Nickase WRN (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para WRN. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:WRN Anticorpo (D-6): sc-376182
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
WRN Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401860-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
WRN Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401860-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O WRN codifica uma helicase/exonuclease de DNA da família RecQ que coordena a replicação do DNA, a recombinação e múltiplos processos de reparo do DNA, incluindo o reparo por excisão de bases e a recombinação homóloga. O WRN sustenta a estabilidade da forquilha de replicação e participa da manutenção dos telômeros, contribuindo assim para a integridade do genoma durante a fase S e em resposta ao estresse replicativo. A perda da função de WRN está associada à síndrome de Werner e está ligada à senescência celular precoce, à instabilidade cromossômica e à sinalização alterada de dano ao DNA. O WRN também é estudado por seu papel em contextos de instabilidade de microssatélites e por interações de vias com a sinalização ATR/ATM, o reparo dependente de PARP e o controle de checkpoints.
WRN O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus WRN em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de WRN. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função WRN. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com WRN interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.